科研ELISA試劑盒法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大，可概括四個方面： 、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。 2、研究抗酶抗體的合成。 3、顯現微量的免疫沉淀反應。 4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

基本方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為～0μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.ml，4℃過一夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.ml。37℃孵育0.5～小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃0～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則40nm）處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。

基本方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至～0μg／ml，每孔加0.ml，4℃過一夜。次日洗滌3次。
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加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）
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于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
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其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。