使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
?產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因大豆EPSPS基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格：48T/盒
類別:熒光-PCR法
運(yùn)輸：低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途：生化實(shí)驗(yàn)，合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。

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性能指標(biāo)：點(diǎn)擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?3-氟-4-溴-苯乙酮　500mL　Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.5 　常溫保存

三乙基膦酰乙酯　500mL　Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH9.0 　常溫保存

多聚甲　500mL　Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH9.5 　常溫保存

丙烯縮二乙醇　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.0 　常溫保存

,2,4-丁三醇　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.4 　常溫保存

分子篩　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.5 　常溫保存

2-氯-4,6-二基啶　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.6 　常溫保存

鈦乙酯　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.0 　常溫保存

N-叔丁氧羰基-L-谷氨 -芐酯　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.5 　常溫保存

Boc-L-天冬氨 -芐酯　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.0 　常溫保存

4-氨基-2,5-二基酚　250mL　Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.5 　常溫保存

5-氨基--基吡唑-4-甲乙酯　00mL　Sodium Pyrophosphate Solution，200mM　常溫保存

3-(三氟基)苯鹽鹽　500mL　Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution　常溫保存

四丁基化銨　000mL　SSC,20X 　常溫保存

苯甲砜　000mL　SSPE,20X,pH7.4　常溫保存
轉(zhuǎn)基因大豆EPSPS基因核酸檢測試劑盒ADP(Adenosine diphosphate)   人二磷腺苷　CAS:　82240-09-3 　  　  規(guī)格：　25mg

PG(Proteoglycan)   人蛋白聚糖　CAS:　56-29- 　  　  規(guī)格：　500mg

PYD(Pyridinoline)   人吡啶酚　CAS:　532-76-3 　  　  規(guī)格：　g

5-HIAA(5-hydroxyindolacetic acid)   人5羥基吲哚乙　CAS:　07-4-5 　  　  規(guī)格：　25mg

2-HETE(20-hydroxyeicosatetraenoic acid)   人2羥二十烷四烯　CAS:　36-77-6 　  　  規(guī)格：　200mg

Hyp(hydroxyproline)   人羥脯氨　CAS:　7-00- 　  　  規(guī)格：　200mg

NO(nitric oxide)   人一氧化氮　CAS:　56-92-8 　  　  規(guī)格：　250mg

ENA-78/CXCL5(Epithelial neutrophil activating peptide 78)   人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78　CAS:　5-56-9 　  　  規(guī)格：　200mg

VC(Vitamin C)   人　CAS:　80-49-9 　  　  規(guī)格：　250mg

VB6(Vitamin B6)   人6　CAS:　9003-07-0 　  　  規(guī)格：　3 strips

sP-selectin(soluble P-selectin)   人可溶性P選擇素　CAS:　8-56-9 　  　  規(guī)格：　500mg

TIMP-(tissue inhibitors of metalloproteinase )   人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子　CAS:　304-20- 　  　  規(guī)格：　200mg

VD(Vitamin D)   人　CAS:　8-08- 　  　  規(guī)格：　0mg

VK(Vitamin K)   人　CAS:　58-93-5 　  　  規(guī)格：　200mg

VB2(Vitamin B2)   人2　CAS:　35-09- 　  　  規(guī)格：　200mg