兔抗人小鼠血清抗體*,兔抗人小鼠血清抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應(yīng)的標記抗體有HRP標記抗體，F(xiàn)ITC標記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應(yīng)在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規(guī)格：0.5ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質(zhì)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質(zhì)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細胞密度達到60%～70%時，轉(zhuǎn)染MycSSHL，48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應(yīng)緩沖液中，30℃反應(yīng)40 min。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，應(yīng)用放射自顯影技術(shù)檢測32P 標記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應(yīng)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(yīng)2 h。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產(chǎn)品優(yōu)惠:

鼠抗人PTEN/MMAC單克隆抗體    PTEN/MMAC        小鼠降鈣素基因相關(guān)肽CGRP抗體    0.5ml
459    鼠抗人ras蛋白（p2）單克隆抗體    ras Protein       小鼠降鈣素CT抗體    0.5ml
460    鼠抗人視網(wǎng)膜母細胞瘤基因蛋白單克隆抗體    Rb Gene Protein        小鼠堿性磷酸酶ALP抗體     0.5ml
46    鼠抗人ret癌基因蛋白單克隆抗體    ret Oncoprotein      小鼠甲狀腺素抗體TAb抗體    0.5ml
462    鼠抗人視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白單克隆抗體    Retinoblastoma Protein (Rb)      小鼠甲狀腺素T4抗體    0.5ml
463    兔抗牛S-00多克隆抗體    S-00       小鼠甲狀腺球蛋白TG抗體    0.5ml
464    鼠抗人S-00蛋白單克隆抗體    S-00 Protein       小鼠甲狀腺過氧化物酶TPO抗體    0.5ml
465    兔抗人S-00蛋白多克隆抗體    S-00 Protein       小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白PTHrP抗體    0.5ml
466    兔抗人S-00α蛋白多克隆抗體    S-00α Protein       小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白AFP抗體    0.5ml
467    鼠抗人S-00β蛋白單克隆抗體    S-00βProtein       小鼠甲基化酶Methylase抗體    0.5ml
468    鼠抗人肺小細胞癌單克隆抗體    SCLC       小鼠己糖激酶HK抗體    0.5ml