本公司所有產品僅供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！
產品名稱 | 大鼠輸尿管上皮細胞 | 組織來源 | 尿道組織 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 包裝 | T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X0944 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
大鼠輸尿管上皮分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對細長的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結構，沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個在越過小骨盆入口處；最后一個在進入膀胱壁的內部。這些狹窄是結石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處；盆段，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細胞；固有層由細密的結締組織構成，內含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內縱和外環兩層平滑肌組成；外膜為疏松結締組織，營養血管由外膜進入輸尿管。其中，輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠輸尿管上皮采用先中性dan白酶消化、然后機械分離法使輸尿管分層、最后膠原酶消化，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠輸尿管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
準備工作
1. 實驗器材準備：準備無菌的培養皿、培養瓶、移液管、離心管、手術器械等，并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。
2. 試劑準備：配制或購買合適的培養基、消化酶（如、膠原酶等）、胎牛血清、雙抗等試劑，確保其無菌且在有效期內。
3. 實驗動物或組織來源準備：根據實驗需求，選擇合適的動物并進行相應的麻醉或處死，獲取所需組織；或從已有的組織樣本庫中獲取組織。
取材與處理
1. 取材：在無菌條件下，迅速取出目標組織，盡量減少對組織的損傷，并去除多余的脂肪、結締組織等非目的組織。
2. 清洗：將取出的組織用預冷的無菌PBS沖洗數次，以去除血液和雜質。
3. 剪切：將組織剪成約1 - 2mm3的小塊，以便后續消化。
細胞分離
1. 消化：將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中，在37℃恒溫搖床或培養箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管，使消化更均勻。
2. 終止消化：當組織塊大部分被消化成單細胞懸液或小細胞團時，加入含血清的培養基終止消化。
3. 過濾與離心：用細胞篩過濾細胞懸液，去除未消化的組織碎片，然后將濾液以適當的轉速離心，收集細胞沉淀。
細胞觀察與檢測
1. 日常觀察：每天用倒置顯微鏡觀察細胞的形態、生長狀態、密度等，記錄細胞的變化情況，如發現細胞污染或異常，及時采取相應措施。
2. 細胞計數與活力檢測：在需要時，可采用臺盼藍染色等方法對細胞進行計數和活力檢測，以了解細胞的生長情況和健康狀態。
Gibco馬血清 | Gibco熱滅活新西蘭馬血清 |
含有胰島的培養基 | 真空采血管 EDTA-K2 玻璃（紫色） 5ml(13*100) |
PLATEABLE CRYOPRESERVED MALE HUMAN HEPATOCYTES | 真空采血管 EDTA-K2 玻璃（紫色） 4ml(13*75) |
SH-SY5Y 完培/500ml | 真空采血管 促凝劑 PET材質（橙色） 4ml( 13*75) |
細胞專用培養基 | 真空采血管 EDTA-K2 玻璃（紫色） 6-10ml(16*100) |
抗腫瘤壞死因子α小鼠7 | 真空采血管 促凝劑 PET材質（橙色） 5ml(13*100) |
進口分裝血清 | 180nmPEG修飾金納米顆粒 |
人胰腺癌細胞，Capan-2細胞 | 5nmPEG修飾金納米顆粒 |
抗乙酰受體小鼠7 | 真空采血管 EDTA-K2 玻璃（紫色） 2-3ml( 13*75) |
抗補體C1抑制物小鼠7 | 真空采血管 EDTA-K2 PET材質（紫色） 6-10ml(16*100) |
抗I型補體受體小鼠7 | 真空采血管 EDTA-K2 PET材質（紫色） 4ml(13*75) |
抗補體B因子小鼠7 | 真空采血管 EDTA-K2 PET材質（紫色） 5ml(13*100) |
抗補體I因子小鼠7 | 大鼠輸尿管上皮細胞真空采血管 EDTA-K2 PET材質（紫色） 2-3ml( 13*75) |
抗乳鐵蛋白小鼠7 | 真空采血管 分離膠/促凝劑 玻璃（黃色） 6-10ml(16*100) |
去氫松香 | 真空采血管 分離膠/促凝劑 玻璃（黃色） 2-3ml(13*75) |
一、取材與分離
1. 快速操作
- 組織取材后需立即處理，避免長時間暴露于室溫或非營養環境。
- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織，去除血液、雜質。
2. 消化酶選擇
- 根據組織類型選擇消化酶，避免過度消化導致細胞損傷。
- 消化時間需嚴格控制（通常 10-30 分鐘），可通過顯微鏡觀察細胞解離狀態。
二、培養條件優化
1. 培養基選擇
- 使用含血清或特定生長因子的培養基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分細胞需添加胰島素、EGF 等。
- 避免頻繁更換培養基品牌或批次，減少細胞適應壓力。
2. 貼壁與傳代
- 原代細胞貼壁能力較弱，可能需要包被培養皿（如膠原蛋白、多聚賴氨酸）。
- 傳代時密度建議控制在 70%-80%，過度匯合會導致接觸抑制和分化。
三、污染控制
1. 無菌操作
- 全程在超凈臺操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培養基中可添加雙抗，但長期使用可能影響細胞活性。
2. 支原體檢測
- 定期檢測支原體污染（如 PCR 法），污染后需及時丟棄細胞。
四、狀態監控
1. 日常觀察
- 每天檢查細胞形態、密度及培養基顏色，及時更換培養基（通常每 2-3 天換液一次）。
- 異常形態（如細胞變圓、碎片增多）可能提示污染或營養不足。
2. 傳代與凍存
- 原代細胞分裂次數有限（一般 5-10 代），需及時凍存早期代次細胞。
- 凍存液建議使用 DMSO+血清（或專用凍存培養基），梯度降溫后液氮保存。
