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小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

【概要描述】小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:Daudi/LUC (STR)人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞SK-N-SH (STR)人神經(jīng)母細(xì)胞SK-N-BE(2) (STR)人神經(jīng)母細(xì)胞sh-sy5y人神經(jīng)母細(xì)胞NB1人神經(jīng)母細(xì)胞LAN-1人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞LCC18人神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)腸癌細(xì)胞NCI-H660人神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺小細(xì)胞SK-N-MC (STR)人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SW839?人腎癌細(xì)胞

型號: 點擊量:607 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-21
產(chǎn)品詳情

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

組織來源

外周血

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1258

細(xì)胞形態(tài)

內(nèi)皮細(xì)胞樣

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞


小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實驗器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

人外周血淋巴細(xì)胞系;MC/CAR

B淋巴瘤細(xì)胞;Farage

人外周血淋巴細(xì)胞系;U266B1

CHROMOGENIC LISTERIA AGAR BASE (ISO)

人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19

BOUILLON de BASE FRASER         500g

抗鼠CD4單克隆細(xì)胞;YTS191.1.2

ONE BROTH SALMONELLA

抗鼠CD8單克隆細(xì)胞;YTS169.4.2.1

BOUILLON de BASE FRASER    5kg

抗鼠CD8單克隆細(xì)胞系;YTS156.7.7

ONE BROTH SALMONELLA    5kg

人前列腺癌細(xì)胞;2B4

2-YT BROTH

人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688

CHROMOGENIC UTI CLARITY AGAR

人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1

VIOLET RED BILE GLUCOSE AGAR (ISO)

抗鼠CD4單克隆細(xì)胞;YTA3.1.2

DESOXYCHOLATE LACTOSE AGAR (SPECIAL)

人宮頸癌細(xì)胞;Hela229[HeLa229]

YEAST NITROGEN BASE

人骨肉瘤細(xì)胞;HOS

ONE BROTH BASE - LISTERIA

人胚腎細(xì)胞-F克隆;293F

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞ONE BROTH BASE

人肺癌細(xì)胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu

COLD FILTERABLE TRYPTONE SOYA BROTH      5KILOS

SPIN-X超濾濃縮離心管 20ml處理量 30K截留分子量 未滅菌

COLD FILTERABLE TRYPTONE SOYA BROTH      2.5KILOS




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