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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 產(chǎn)品簡稱: AMPK elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片 英文名稱： Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量問題可包換包退，免除您的后顧之憂，所有的elisa試劑盒——免費代測，全程Elisa實驗技術(shù)指導，免費代做實驗。 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)elisa檢測試劑盒 48Ｔ/96Ｔ。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
包裝：液體盒裝（48T/96T）
貯藏：2—8°C，避光防潮保存。
有效期：6個月
AMPK elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片檢測中樣品的處理
．細胞培養(yǎng)物上清：細胞培養(yǎng)物于室溫000g，離心0分鐘后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．血清：標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,000g離心5分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4．尿液：無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測，要保存尿樣，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱保存。
5．組織勻漿：將組織標本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測。注：取樣和樣品處理過程中，防止有毒物質(zhì)對操作人員的危害，要采取相應(yīng)的保護措施。
操作步驟：
. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 00ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 00ul 的蒸餾水；其余微孔中加入00ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 50ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 5-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 0-5 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)
() 抗原包被：用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應(yīng)板，每孔00μl，同時設(shè)陰性細胞培養(yǎng)物對照孔，置4℃過夜。
(2) 洗滌：用洗滌液洗滌2次，每次2min，瀝干。
(3) 加入被檢血清：用保溫液將被檢血清作∶00稀釋，加入反應(yīng)板相鄰的兩個孔中，每孔00μl。同時作陰、陽性標準血清對照，置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次：方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物：用保溫液將酶結(jié)合物作∶4 000稀釋，加入反應(yīng)孔中，每孔00μl，置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次：方法同上。
(7) 加入底物：每孔00μl，置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液：每孔50μl，靜置5min。
(9) 測定OD值：用檢測儀，于492nm波長，按儀器使用及制定標準要求調(diào)節(jié)儀器，測定各反應(yīng)孔的OD值，記錄結(jié)果。
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