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介紹小鼠ELISA試劑盒的注意事項

更新時間:2021-04-26 點擊量:486
  小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,用抗小鼠INS抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的小鼠INS會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入化的抗小鼠INS抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。
  抗小鼠INS抗體與結合在包被抗體上的小鼠INS結合、與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,INS濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中INS的濃度。
  Elisa試劑盒實驗反應時間注意事項:
  、在備孔稀釋好待測樣品和標準品;
  2、上板:應從后一孔上完板開始計時,以確保反應時間;
  3、加底物:應從加第一孔開始計時,以確保加終止液時的反應時間是5分鐘。
  小鼠ELISA試劑盒注意事項:
  )試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
  2)實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
  2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
  3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
  4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
  5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
  7)底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,實驗完成后應立即讀取OD值。
  8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
  9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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