人神經(jīng)激肽B ELISA 檢測試劑盒內容及其配制  

elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒，提供免費代測服務，保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量00%保證，若存在質量問題，我們無條件包退換 試驗原理：　　　　NK B試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知NK B濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將NK B和標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NK B的濃度呈比例關系。　 安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，000×g離心0分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---000×g離心0分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育0分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。 6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。試劑盒性能. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2. 特異性：不與其它細胞因子反應。3. 重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于0%。結 果 判 斷 與 分 析、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的NK B標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的NK B含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-240nmol/L